【摘要】 目的观察轮叶党参酒精提取液的抗疲劳作用。方法将28只健康的wistar大鼠随机分成4组，每组7只，即对照组，轮叶党参高浓度组、中浓度组 、低浓度组；取40只昆明小鼠经测定游泳基础时间后，筛选出28只随机分成4组，每组7只，即对照组，轮叶党参高浓度组、中浓度组、低浓度组；分别灌胃2周后，利用rm-6240系统分析电刺激大鼠坐骨神经对在体比目鱼肌收缩力学指标的影响；测定大鼠比目鱼肌的sod和mda值；观察小鼠负重游泳时间。结果轮叶党参使大鼠比目鱼肌单收缩的潜伏期缩短、最大收缩幅度增强、1/2舒张时间延长，使强直收缩的潜伏期缩短、最大收缩幅度、疲劳指数增强，使大鼠比目鱼肌的sod活性增强、mda值下降，使小鼠负重游泳时间延长。结论轮叶党参酒精提取液具有抗疲劳作用。
【关键词】 党参属； 比目鱼肌； 骨骼肌力学； 自由基
轮叶党参又名山海螺、四叶参、羊乳、羊奶、羊奶参、白莽肉、山胡萝卜等，系桔梗科多年生草本质缠绕藤本，有白色乳汁。以“羊乳”之名始载于《名医别录》，是长白山区珍贵的山野菜和中药材，含有丰富的维生素、氨基酸及铁、锌、钛等元素。现代药理学研究表明，轮叶党参具有降血脂、抗氧化、抗突变、抗肿瘤及提高机体免疫力的作用［1～4］。骨骼肌作为人体运动的动力器官，收缩能力的高低是影响人体运动能力的重要因素。如何提高骨骼肌收缩能力以及探讨长时间运动时骨骼肌疲劳机制是运动生理的研究热点之一。中药对骨骼肌抗疲劳的研究非常广泛，目前对骨骼肌收缩力学的报道较少。本实验观察了轮叶党参酒精提取液对大鼠在体骨骼肌的收缩力的指标和生化指标sod和mda值及小鼠负重游泳时间的影响。
1 材料与仪器
1.1 轮叶党参50%酒精提取液由延边大学基础医学院卫生毒理学教研室提供，每毫升含1 g生药，临用前加入生理盐水配制成10 g/l稀释液。
1.2 动物体质量为180～200 g的wistar系雄性大鼠28只和体质量为18～20 g的雄性昆明种小鼠40只，均由延边大学医学部实验动物科提供。
1.3 仪器及试剂rm-6240多道生理信号采集处理系统及jzj101压力换能器(50 g)，由成都泰盟科技有限公司生产。sod测试盒、mda测试盒由南京建成生物工程研究所生产。
2 方法
2.1 大鼠骨骼肌收缩力影响将28只大鼠随机分为轮叶党参高、中、低浓度组及对照组，每组各为7只，分别灌胃。各给药组给予相应剂量(960，480，240 mg/kg)轮叶党参，对照组给予等容量生理盐水灌胃，1次/d，连续14 d。末次给药30 min后，腹腔注射100 g/l水合氯醛(300mg/kg)进行麻醉，大鼠采用腹卧位固定，制作两侧的坐骨神经-比目鱼肌标本，标本通过张力换能器与rm6240系统连接。从0.1 v开始刺激(延时20 ms，波宽2 ms)，寻找阈刺激强度后逐渐增加刺激强度直至引起单收缩最大收缩幅度的最小刺激强度，在2倍单刺激强度条件下观察肌肉单收缩的潜伏期(ct)、收缩幅度(pt)及最大舒张1/2时间(hrt)； 在适当频率下刺激神经，观察骨骼肌完全性强直收缩的潜伏期(ct)、收缩幅度(pt)及疲劳指数(fi)。
2.2 大鼠比目鱼肌sod和mda值测定骨骼肌收缩力测定结束后，小心地取出对侧未测定的比目鱼肌，立刻放入液氮中速冻(-80℃)，严格按照试剂盒说明书执行sod、mda的测定。
2.3 小鼠负重游泳时间的影响首先对40只小鼠进行游泳训练，共2次，30 min/次，间隔3 d。在小鼠尾部1/3～2/3处负重(体重的5％)测量游泳时间，间隔3 d，共3次。选择游泳时间标准差＜10 min的28只小鼠，随机分为轮叶党参高、中、低浓度组及对照组，每组各为7只分别灌胃，给予各给药组小鼠相应剂量(2.0，1.0，0.5 g/kg)的轮叶党参 ，给予对照组小鼠等容量生理盐水，1次/d，连续14 d。于第14天末次给药灌胃30 min后，在小鼠尾部1/3～2/3处负重(体质量的10％)，放入水深为22 cm，水温为28℃的水槽中游泳，观察和记录每只小鼠沉入水下10 s不能浮出水面的时间；同时观察给药前、后小鼠体质量的变化情况。
2.4 统计学处理实验数据以±s表示，采用prism 3.0统计软件进行单因素方差分析。
3 结果
3.1 轮叶党参对大鼠比目鱼肌收缩力的影响轮叶党参高、中、低浓度组大鼠比目鱼肌单收缩的潜伏期明显缩短，最大收缩幅度明显增加，高浓度组大鼠1／2 舒张时间明显延长，与对照组比较均有显著性差异(p<0.05，p<0.01)；明显缩短强直收缩的潜伏期，增加最大收缩幅度及疲劳指数，与对照组比较均有显著性差异（p<0.05或p<0.01）。见表1。表1 轮叶党参对大鼠比目鱼肌收缩力的影响（略）
3.2 轮叶党参对大鼠比目鱼肌生化指标的影响大鼠mda含量减少，高浓度组与对照组比较有显著性差异(p<0.01) ；大鼠比目鱼肌sod含量均增加，高浓度组与对照组比较有显著性差异(p<0.05)，有统计学意义。 见表2。表2 轮叶党参对大鼠比目鱼肌生化指标的影响结果（略）
3.3 轮叶党参对小鼠负重游泳时间的影响轮叶党参高浓度组小鼠体重在灌胃1周和灌胃2周后分别与对照组的比较(p<0.05，p<0.001)有统计学意义，而且轮叶党参高浓度组和中浓度组的游泳时间也比对照组明显增加（p<0.01，0.001），具有显著性差异 。表3 轮叶党参提取液对小鼠负重游泳实验结果（略）
4 讨论
本研究结果表明，轮叶党参具有缩短大鼠骨骼肌收缩的潜伏期，增强骨骼肌的收缩力，延缓hrt及提高疲劳指数的作用，高及中浓度的轮叶党参可明显延长小鼠的负重游泳时间，提示轮叶党参酒精提取液的有效成分具有抗疲劳作用。 在生物体内，许多生物化学反应都产生内源性活性氧自由基。在正常条件下，机体的抗氧防御体系使自由基的产生和清除保持严格的动态平衡。但在力竭性运动中，机体耗氧增加，氧自由基生成增加，脂质过氧化加强，在脂质过氧化过程中可以产生大量的自由基和一系列自由基链式反应，它们可以攻击细胞膜和细胞内的酶，导致蛋白质变性，酶失活［5,6］。天然抗氧化剂能够清除或抑制自由基的产生，阻断自由基链式反应启动和蔓延，从而预防和减轻自由基对机体的损伤［7,8］。 轮叶党参是常用的补中益气药。 在轮叶党参对大鼠sod活力影响实验中发现［9］， 轮叶党参提取液可使它们的sod活性明显高于对照组，mda含量测定结果表明，摄入轮叶党参的动物不仅sod酶活性单位值增高，而且机体内脂质过氧化物的产生量也明显降低，说明摄入轮叶党参不仅增强了对自由基的清除，而且能够减少机体内自由基的发生。本实验生化结果亦表明高浓度组与对照组相比mda含量减少，sod活性增高，有统计学意义。说明轮叶党参酒精提取液的有效成分可显著提高大鼠骨骼肌中超氧化物歧化酶(sod)活性，降低脂质过氧化产物丙二醛(mda)含量，增强机体清除自由基的能力，减少机体内自由基的产生，延缓疲劳的出现，从而抑制机体衰老作用，但其机制尚不明确，有待于进一步的深入研究。
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