黄酮类化合物的提取工艺研究(海蓬子总黄酮提取工艺优化研究)

中国论文网 发表于2022-11-05 23:33:41 归属于医疗卫生 本文已影响525 我要投稿 手机版

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作者:顾婕, 杨莉萍, 赵微加, 叶辉 张春银

【摘要】 目的用单因素和正交实验法优选海蓬子中总黄酮的提取工艺。方法采用乙醇提取工艺,对影响黄酮提取得率的主要因素进行分析,用正交实验法确定海蓬子中总黄酮的提取工艺。结果最佳提取工艺条件:乙醇浓度70%,提取时间120min,固液比1∶100(g∶ml),提取温度80℃。在该条件下,海蓬子总黄酮得率为2.86%。结论该方法是提取海蓬子中总黄酮的有效途径。

【关键词】 海蓬子; 黄酮; 乙醇提取

海蓬子salicornia bigelovii tor属于藜科海蓬子属(又译盐角草属)植物[1],直接用海水灌溉。海蓬子种子含油量约30%,其中不饱和脂肪酸含量高达90%[2,3],其嫩尖组织中的微量皂角苷,可中和人体血液中的脂肪酸,降低血管壁上胆固醇,具有降压、降脂、减肥作用。在欧洲,海蓬子被称为“减肥草”[2]。除含有人体必需的氨基酸、微量元素、维生素外,其中的胡萝卜素含量超过普通蔬菜的40倍[4],可作为绿色有机蔬菜、保健食品、保健油等的原料。栽培海蓬子还有益于改良生态环境,它吸收与利用海水水产养殖池排污物的营养;构建生态湿地,为野生禽类提供食物和栖息地等[5]。wWW.lunwen.net.cn海蓬子在我国江苏、辽宁、河北、山东等省都有生长,多见于盐沼地、盐湖旁及海滩。从海蓬子中分离得到槲皮素(quercetin)、槲皮素-3-o-β-d-葡萄糖苷(quercetin-3-o-β-d-glucoside)、芸香苷(rutin)、异鼠李素-3-o-β-d-葡萄糖苷(isorhamnetol-3-o-β-d-glucoside) 等黄酮类物质[6~8],但还未见提取工艺研究的报道。为了提高海蓬子中总黄酮提取工艺的 科学 性,进一步研究和开发利用海蓬子,特以总黄酮为考察指标,采用单因素和正交实验法确定最佳的提取条件。黄酮类化合物多采用水、乙醇、丙酮等溶剂提取,总黄酮包括黄酮苷及其苷元,黄酮苷易容易水和乙醇,但苷元的水溶性差,故本研究以乙醇为提取溶剂。

   1 材料与仪器

  新鲜海蓬子由江苏省盐城市绿苑海蓬子开发有限公司提供。全草淋洗沥干后70℃鼓风烘干,粉碎过60目筛,密封于阴暗干燥处保存备用。芦丁(生化试剂)购自 中国 医药集团上海化学试剂公司,95%乙醇、氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝等均为分析纯。uv-1200紫外可见分光光度计(上海美普达仪器有限公司)、dk-600电热恒温水槽(上海精密实验设备有限公司)、 电子 天平(赛多利斯科学仪器有限公司)、fz102微型植物粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司)。

   2 方法

  海蓬子总黄酮含量的测定——nano2-al(no3)3比色法[9]。

  2.1 芦丁标准曲线的绘制[10]用分析天平称取芦丁标准品0.025 0g,用30%的乙醇溶解,定容至100 ml,摇匀,得到0.25mg/ml的芦丁标准溶液,备用。分别准确吸取芦丁标准溶液1.0 ,2.0 ,4.0 ,6.0 ,8.0 ml于25 ml的容量瓶中,用30%乙醇补至约12.5 ml,加入5%亚硝酸钠1.0 ml,摇匀,放置5 min,加入10%硝酸铝溶液1.0 ml,摇匀,放置6 min。加入1.0 mol/l 氢氧化钠溶液5 ml,用30%乙醇定容至刻度,摇匀,放置10 min。用空白液作参比,用紫外可见分光光度计测定510 nm处的吸光度。所得标准曲线为芦丁浓度y和吸光值x的关系,所得回归方程为:y=11.363x-0.034 2,r = 0.999 8。

  2.2 海蓬子总黄酮的提取及测定称取1.00 g海蓬子粉末于锥形瓶中,按一定的料液比,加入一定浓度溶剂在一定温度下提取一定时间。离心得上清提取液,加入相应的溶剂定容至100 ml。

  准确吸取定容后的2 ml水提取液或乙醇提取液于25 ml容量瓶中,用30%乙醇补至12.5 ml。加入5%亚硝酸钠1.0 ml,摇匀,放置5 min后加入10%硝酸铝1.0 ml,放置6 min后再加入1 mol/l氢氧化钠5 ml,混匀。用30%乙醇定容至刻度,10 min后以空白液为参比测定510 nm处的吸光度。

  样品黄酮得率的 计算 公式如下:

  x(%)=c×v2×25×10-3m×v1×100%

  x=样品总黄酮得率(%); c=提取液中的总黄酮含量(mg/ml);

  m=海蓬子样品的质量(g); v1=测定吸光度所用的样液体积(ml);

  v2=样品定容后的体积(ml)。

   3 结果

  3.1 提取温度对总黄酮得率的影响称取1.00 g样品,加入80ml 70%的乙醇,分别在20,40,60,80,100℃温度下提取60 min,考察提取温度对黄酮得率的影响。结果(图1)表明,温度达到80℃时,黄酮的得率最高。因此最佳提取温度选择为80℃。

  3.2 提取时间对黄酮得率的影响称取1.00 g样品,加入80 ml 70%的乙醇中,在80℃下提取,考察提取时间对黄酮得率的影响。结果(图2)表明,随着提取时间的延长得率逐渐增加,当乙醇提取时间为180 min时,得率达到最高,随着浸提时间的延长,得率反而下降,因此乙醇提取最佳时间为180 min。

  3.3 固液比对总黄酮得率的影响称取1.00 g样品,分别加入20,40,60,80,100 ml的70% 乙醇中(固液比分别为1∶20,1∶40,1∶60,1∶80, 1∶100),分别在80℃下提取60 min,考察固液比对黄酮得率的影响。结果(图3)表明,随着固液比的增加,海蓬子总黄酮的得率逐渐提高。当乙醇的固液比达到1∶80(g∶ml)时,得率出现峰值,再提高固液比,得率趋于平缓,因此最佳提取固液比为1∶80。

  图3 固液比对黄酮得率的影响 图4 乙醇浓度对黄酮得率的影响

  3.4 乙醇浓度对黄酮得率的影响称取1.00 g样品,分别加入15%,30%,40%,50%,60%,70%,80%,90% 的乙醇溶液60 ml,80℃浸提60 min,考察乙醇浓度对黄酮得率的影响。由结果(图4)可知,黄酮得率随着乙醇浓度的增大而增加,当浓度达到70%时得率最大;当乙醇浓度继续增加时,得率有较大幅度的下降,故最佳乙醇浓度为70%。

  3.5 海蓬子中总黄酮提取条件的优化以乙醇浓度(60%,70%,80%)、提取时间(120 ,150,180 min)、固液比(1∶80,1∶90,1∶100)为正交因素,在80℃条件下,海蓬子中总黄酮的得率为指标,设计3因素3水平正交实验。结果见表1。表1 海蓬子黄酮乙醇提取法正交实验结果

  由表1正交实验结果可见,乙醇浓度对海蓬子总黄酮得率的影响程度最大,提取时间和固液比的影响均不显著,影响程度大小顺序为:乙醇浓度>提取时间>固液比,最佳乙醇提取条件为a2b1c3,即乙醇浓度70%,提取时间120 min,固液比1∶100。

   4 结论

  以乙醇为溶剂提取海蓬子总黄酮,研究了单因素对提取得率的影响,通过正交实验确定了最佳提取工艺条件为:乙醇浓度70%,提取时间120 min,固液比1∶100,此时海蓬子总黄酮的得率是2.86%。乙醇浓度对得率的影响程度最大,提取时间和固液比的影响均不显著。

【 参考 文献 】
  [1] 洪立洲,丁海荣,杨智青,等.盐生植物海蓬子的研究进展及前景展望[j].江西农业学报 2008,20(7):46.

  [2] 吕忠进,edwarrd p g.全海水灌溉的作物——北美海蓬子(上)[j].世界农业,2001,2:14.

  [3] 张爱军,刘发义,沈继红,等.海蓬子种子营养成分分析及制备共轭亚油酸的研究[j].海洋 科学 进展,2003,21(1):89.

  [4] 张美霞,刘兴宽. 北美海蓬子引种盐城滩涂后生长条件和营养组成比较[j]. 食品科技,2007,32(5):104.

  [5] 魏成金,尹金来,徐阳春. 不同氮磷水平对北美海莲子生长和品质的影响[j]. 南京农业大学学报,2006,29(4):59.

  [6] park sh, kim ks. isolation and identification of antioxidant flavonoids from salicornia herbacea l[j]. journal of the korean society for applied biological chemistry,2004,47(1):120.

  [7] kong cs,kim mm,et oid glycosides isolated from salicornia herbacea inhibit matrix metalloproteinase in ht1080 cell[j]. toxicology in vitro,2008,22(7):1742.

  [8] min jg, lee ds, kim tj, et al. chemical composition of salicornia herbacea l[j]. journal food science and nurtrition,2002,7:105.

  [9] 张海悦,王黎兵,郭新力.狭叶荨麻总黄酮的测定[j].食品科技,2007,12:181.

  [10] 赵文红, 赵 翾, 白卫东,等. 柿叶黄酮化合物提取工艺研究[j].陕西科技大学学报,2007,25(5):54.

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