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机械离心应力对骨膜细胞与骨髓间充质干细胞体

作者2019-03-27 10:49未知
目的:研究兔骨膜细胞与骨髓间充质干细胞相同条件培养下在不同大小的间歇性机械离心应力刺激下向成骨细胞分化情况。方法:将兔颅骨骨膜与股骨骨髓体外无菌条件下取材原代培养,持续培养骨膜细胞与骨髓间充质干细胞传至第三代分别接种于六孔板。采用随机化的原则分为加力组与空白对照组,用台式低速离心机对加力组进行离心力加载。将离心力调整至相应大小后,加力组加载170g、210g、250g的应力刺激。对照组不加力刺激且其余条件相同也置于超净台10min/d。定期取样测定细胞ALP活性、通过MTT法测定各组细胞的增殖能力、染色检测矿化情况;实时荧光定量PCR法测定两种细胞的成骨相关基因骨钙素OCN、RUNX2 mRNA的相对表达量。结果:1.骨膜细胞与BMSCs在170g,210g和250g间歇性机械离心力加载下ALP活性增高、增殖活性升高;细胞形成的钙化结节数目增多、细胞成骨相关的基因OCN和RUNX2 mRNA的相对表达量显著增加(P0.05)。2.骨膜细胞250g加力组与BMSCs中170g和250g组细胞增殖活力、ALP活性、矿化结节数目、骨钙素OCN和RUNX2 mRNA的相对表达量增长显著(P0.05)。结论:1.间歇性机械离心力使兔骨膜细胞与BMSCs体外细胞矿化和增殖能力提升,促进骨钙素OCN、RUNX2的表达。2.相同条件下两种细胞170g、210g、250g加力组中,骨膜细胞250g组、BMSCs中170g和250g组的细胞增殖与ALP活性、钙化结节数目、骨钙素OCN和RUNX2 mRNA的相对表达量升高显著。3.兔骨膜细胞与BMSCs的成骨效果与间歇性机械离心力大小有关。

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